影像水牛活体采卵效果的原因有哪些
2018-12-26 返回列表
水牛活体采卵技术的成功建立，对加快良种水牛育种繁殖进程、保护优良的水牛种质资源等具有重要的意义。而在活体采卵过程中需要考虑各种因素对采卵成功造成的影像。
1、年龄及个体对采卵效果的影响
由黄牛的活体采卵结果可知，各年龄段的母牛均可用作活体采卵的供体。青年母牛(13～15月龄)甚至性成熟前的犊牛(6～9月龄)均可作为活体采卵的供体，而且不会影响这些牛卵巢的功能和以后的妊娠率;但水牛的性成熟较晚，育成母牛卵巢也普遍较小，因此业内较少开展育成母水牛的活体采卵。目前，有通过激素处理对水牛幼畜进行活体采卵的研究，中国农业科学院广西水牛研究所长期开展有关成年水牛的活体采卵。黄右军等［4］报道，将42头河流型奶水牛按年龄分为A组(3～7岁)、B组(8～12岁)和C组(13～17岁)进行活体采卵，每周采集2次，结果表明，A组获得的可用卵母细胞为(4.35±3.14)枚，明显高于B组［(2.47±2.58)枚］、C组［(2.36±2.24)枚］，3～7岁母水牛较适宜用于活体采卵，不同个体差异也非常明显。
2、性周期及生理状态对采卵效果的影响
由活体采卵的操作机理可知，只要采卵针能经母牛阴道穹窿顶部穿刺到卵巢(卵泡)即可开展活体采卵，因此无论性周期是哪一天还是乏情的母水牛，即使处于产奶、干奶、怀孕的母水牛均可用于活体采卵，唯有需要考虑的是活体采卵效率或者供体牛的遗传价值。怀孕母牛的卵母细胞回收率和分裂率低于未怀孕母牛，泌乳母牛可采卵泡数和回收率与干奶期母牛相近，而泌乳母牛卵母细胞的可用率和分裂率明显高于干奶期母牛。
一般处于乏情期的母水牛卵巢上可采卵泡数较少，卵巢质地偏硬，育成母牛卵巢普遍较小，不宜对两者进行活体采卵。而在性周期方面，虽然在性周期的不同时间可采卵泡数有所不同；但经第1次采卵后，各卵巢上的可采卵泡已基本采出，卵泡期趋于一致，后续的采出效率基本相同，因此对于长期批量活体采卵无需刻意选择性周期的哪一天进行活体采卵，需要考虑的是活体采卵间隔。
3、激素处理对采卵效果的影响
外源性激素可促进卵巢卵泡发育，使可供采集卵母细胞数增加，质量提高。在活体采卵前用2000IU孕马血清促性腺激素(PMSG)和2000IU人绒毛膜促性腺激素(hCG)对15头地中海青年母水牛(5～9月龄)进行处理，结果表明，激素处理并不增加卵巢的卵泡总数，但可以增加中等以上卵泡数，并提高可用卵母细胞数。用沼泽型发情水牛5头和产后泌乳水牛6头，分为促卵泡素(FSH)处理组和对照组，进行活体采卵效率的研究，结果表明，经FSH处理的发情水牛和产后泌乳水牛回收卵母细胞数分别为(3.7±2.7)枚、(5.9±3.5)枚，且差异不显著(P＞0.05)；对照组发情水牛和产后泌乳水牛卵母细胞回收数分别为(1.4±1.3)枚、(0.7±0.8)枚，且差异不显著(P＞0.05)。说明应用FSH处理可以提高回收卵母细胞的数量。
4、活体采卵间隔及持续时间对采卵效果的影响
采用B型超声波引导法对水牛进行活体采卵，对阴道穹窿和卵巢有一定损伤，但恢复较快，不影响卵泡的正常发生和发育。间隔3d采卵1次是可行的，且安全有效。随着采卵次数的增多，平均回收的卵子数和回收率均有降低的趋势。在对8头干奶期母水牛进行9个月的连续活体采卵，开始每周活体采卵2次，68d后改为每周活体采卵1次，结果表明，前6个月平均获卵丘——卵母细胞复合体(COCs)2.56枚，囊胚率为16%，后3个月平均获COCs1.57枚，囊胚率为0。说明经过6个月的活体采卵后，母水牛的卵泡库储备基本耗尽，虽然以后可采到卵母细胞，但因质量差不能发育成囊胚。
5、真空泵负压对采卵效果的影响
回收卵子可用率的高低主要取决于附着在卵子上卵丘细胞的多少和形态。—般认为，黄牛活体采卵所需真空负压范围为4666.2～15998.4Pa，以每分钟液体流量20～40mL为宜。真空压力为13332Pa是最佳吸卵负压，此时优质卵母细胞数量最多，随着压力的增大，虽然回收率增加;但对卵母细胞及其周围颗粒细胞的形态损伤较大，卵母细胞受精率和囊胚率明显降低。对奶水牛进行活体采卵时，实际采用的负压在4666.2～7999.2Pa之间，结果表明，所采集的卵母细胞中裸卵所占比例也较多。综上所述，活体采卵所需真空度的压力大小取决于所用的仪器(包括采卵针类型和导管系统)以及牛的品种。
6、季节对采卵效果的影响
水牛的发情具有较强的季节性，这一特性也影响了水牛的活体采卵效果。庞春英等［7］统计了2006—2008年活体采卵数据，春季活体采卵每头牛平均回收卵子数为(4.80±1.77)枚，可用卵子(2.77±1.19)枚;夏季每头牛平均回收卵子数为(3.72±1.58)枚，可用卵子(2.11±1.11)枚;秋、冬季每头牛平均回收卵子数为(5.88±2.84)枚，可用卵子(3.56±1.51)枚，表明水牛活体采卵效果受季节影响较大，秋、冬季节活体采卵效果最好，春季次之，夏季最差。原因可能是在发情旺季时水牛卵巢上有较多的卵泡发育，可采集的卵泡数较多，每头牛平均回收卵子数随之增加，但各个季节的卵母细胞可用率差异不显著(P＞0.05)。
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1、年龄及个体对采卵效果的影响
由黄牛的活体采卵结果可知，各年龄段的母牛均可用作活体采卵的供体。青年母牛(13～15月龄)甚至性成熟前的犊牛(6～9月龄)均可作为活体采卵的供体，而且不会影响这些牛卵巢的功能和以后的妊娠率;但水牛的性成熟较晚，育成母牛卵巢也普遍较小，因此业内较少开展育成母水牛的活体采卵。目前，有通过激素处理对水牛幼畜进行活体采卵的研究，中国农业科学院广西水牛研究所长期开展有关成年水牛的活体采卵。黄右军等［4］报道，将42头河流型奶水牛按年龄分为A组(3～7岁)、B组(8～12岁)和C组(13～17岁)进行活体采卵，每周采集2次，结果表明，A组获得的可用卵母细胞为(4.35±3.14)枚，明显高于B组［(2.47±2.58)枚］、C组［(2.36±2.24)枚］，3～7岁母水牛较适宜用于活体采卵，不同个体差异也非常明显。
2、性周期及生理状态对采卵效果的影响
由活体采卵的操作机理可知，只要采卵针能经母牛阴道穹窿顶部穿刺到卵巢(卵泡)即可开展活体采卵，因此无论性周期是哪一天还是乏情的母水牛，即使处于产奶、干奶、怀孕的母水牛均可用于活体采卵，唯有需要考虑的是活体采卵效率或者供体牛的遗传价值。怀孕母牛的卵母细胞回收率和分裂率低于未怀孕母牛，泌乳母牛可采卵泡数和回收率与干奶期母牛相近，而泌乳母牛卵母细胞的可用率和分裂率明显高于干奶期母牛。
一般处于乏情期的母水牛卵巢上可采卵泡数较少，卵巢质地偏硬，育成母牛卵巢普遍较小，不宜对两者进行活体采卵。而在性周期方面，虽然在性周期的不同时间可采卵泡数有所不同；但经第1次采卵后，各卵巢上的可采卵泡已基本采出，卵泡期趋于一致，后续的采出效率基本相同，因此对于长期批量活体采卵无需刻意选择性周期的哪一天进行活体采卵，需要考虑的是活体采卵间隔。
3、激素处理对采卵效果的影响
外源性激素可促进卵巢卵泡发育，使可供采集卵母细胞数增加，质量提高。在活体采卵前用2000IU孕马血清促性腺激素(PMSG)和2000IU人绒毛膜促性腺激素(hCG)对15头地中海青年母水牛(5～9月龄)进行处理，结果表明，激素处理并不增加卵巢的卵泡总数，但可以增加中等以上卵泡数，并提高可用卵母细胞数。用沼泽型发情水牛5头和产后泌乳水牛6头，分为促卵泡素(FSH)处理组和对照组，进行活体采卵效率的研究，结果表明，经FSH处理的发情水牛和产后泌乳水牛回收卵母细胞数分别为(3.7±2.7)枚、(5.9±3.5)枚，且差异不显著(P＞0.05)；对照组发情水牛和产后泌乳水牛卵母细胞回收数分别为(1.4±1.3)枚、(0.7±0.8)枚，且差异不显著(P＞0.05)。说明应用FSH处理可以提高回收卵母细胞的数量。
4、活体采卵间隔及持续时间对采卵效果的影响
采用B型超声波引导法对水牛进行活体采卵，对阴道穹窿和卵巢有一定损伤，但恢复较快，不影响卵泡的正常发生和发育。间隔3d采卵1次是可行的，且安全有效。随着采卵次数的增多，平均回收的卵子数和回收率均有降低的趋势。在对8头干奶期母水牛进行9个月的连续活体采卵，开始每周活体采卵2次，68d后改为每周活体采卵1次，结果表明，前6个月平均获卵丘——卵母细胞复合体(COCs)2.56枚，囊胚率为16%，后3个月平均获COCs1.57枚，囊胚率为0。说明经过6个月的活体采卵后，母水牛的卵泡库储备基本耗尽，虽然以后可采到卵母细胞，但因质量差不能发育成囊胚。
5、真空泵负压对采卵效果的影响
回收卵子可用率的高低主要取决于附着在卵子上卵丘细胞的多少和形态。—般认为，黄牛活体采卵所需真空负压范围为4666.2～15998.4Pa，以每分钟液体流量20～40mL为宜。真空压力为13332Pa是最佳吸卵负压，此时优质卵母细胞数量最多，随着压力的增大，虽然回收率增加;但对卵母细胞及其周围颗粒细胞的形态损伤较大，卵母细胞受精率和囊胚率明显降低。对奶水牛进行活体采卵时，实际采用的负压在4666.2～7999.2Pa之间，结果表明，所采集的卵母细胞中裸卵所占比例也较多。综上所述，活体采卵所需真空度的压力大小取决于所用的仪器(包括采卵针类型和导管系统)以及牛的品种。
6、季节对采卵效果的影响
水牛的发情具有较强的季节性，这一特性也影响了水牛的活体采卵效果。庞春英等［7］统计了2006—2008年活体采卵数据，春季活体采卵每头牛平均回收卵子数为(4.80±1.77)枚，可用卵子(2.77±1.19)枚;夏季每头牛平均回收卵子数为(3.72±1.58)枚，可用卵子(2.11±1.11)枚;秋、冬季每头牛平均回收卵子数为(5.88±2.84)枚，可用卵子(3.56±1.51)枚，表明水牛活体采卵效果受季节影响较大，秋、冬季节活体采卵效果最好，春季次之，夏季最差。原因可能是在发情旺季时水牛卵巢上有较多的卵泡发育，可采集的卵泡数较多，每头牛平均回收卵子数随之增加，但各个季节的卵母细胞可用率差异不显著(P＞0.05)。
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