OPU活体采卵仪对母牛活体采卵的频率必须考虑两个问题，一是牛生殖道和卵巢创伤在进行下一次采卵时应基本恢复正常；二是采卵时卵巢上应有重新发育起来的可采卵泡。对经过反复活体采卵的牛屠宰后观察发现，虽然卵巢出血和穿刺痕迹清晰可见，但卵巢与周围组织没有发生粘连，也没有发生卵巢囊肿等生殖疾病。此外，反复采卵的牛在采卵停止后，能很快发情并经人工授精而妊娠，也没有发生乳房炎。虽然应用内窥镜进行采卵时，对yin道弯窿造成的创伤大，但只要不发生感染，一般经过2～3d即可恢复原状。但是长期高频率的进行活体采卵可能对牛的卵巢产生永久损伤。连续的长期的穿刺，会使一些供体牛会卵巢囊肿，进而干扰供体牛的内分泌系统，致使发情周期改变，发情程度减弱。对3头杂交黄牛进行了约半年左右时间的活体卵母细胞的采集。采集次数分别为138，63，104次。后将其屠宰后对卵巢进行观察，可见被膜增厚并包埋有脂肪层，经组织切片发现，采集次数越多者卵巢被膜增厚越严重，脂肪细胞明显增多，卵巢皮质部范围缩小，髓质部范围增加，卵巢皮质部卵泡数量明显减少，卵泡萎缩并且周围包围有大量的结缔组织，且有部分脂肪细胞浸润。



牛一个发情周期中一般有3～4个卵泡波，即发情后3～4d，9～10d，15～16d为卵泡发育成熟高峰期，3～4d的卵泡数明显多于9～10d，15～16d的卵泡数。OPU活体采卵仪发现每周一次采卵，所获得的卵母细胞主要来自卵泡波中第7d的卵泡。此时卵巢上已有优势卵泡，优势卵泡的存在将使其余非优势卵泡处于闭锁早期，但是，闭锁早期的卵泡仍具有较强体外胚胎形成能力。因此，发情后每隔7d重复采集卵母细胞较为合理。间隔5d采卵，卵母细胞均处于生长阶段，穿刺取出时，细胞内积累的能量物质不充分，因而卵母细胞发育能力较低。间隔10d采卵，卵泡已经处于晚期闭锁阶段，卵母细胞开始凋亡，会影响其发育能力。因而间隔7d采卵可获得较优质的卵母细胞。活体采卵后间隔3～4d，卵巢上就有可供采集的大量卵泡重新生长发育起来。倪和民等利用内窥镜进行采卵结果，OPU活体采卵仪发现青年母牛每周采卵1次，每周平均可获得2.4枚卵母细胞，每周2次可获得4.4枚，成年母牛每周1次采卵可获得1.9枚，每周2次可获得5.4枚，两者之间有极显著的差异，按照1次／周和2次／周的频率进行活体采卵，头均获卵数和回收率差异不显著，但2次／周获得的卵母细胞质量比较高，经体外受精可获得较多可用胚。采用B型超声波方法对水牛进行活体采卵，对yin道弯窿和卵巢有一定创伤，但是恢复较快，不影响卵泡的正常发生和发育，间隔3d采卵1次是可行的，安全有效。采卵间隔时间还与奶牛的营养状况，卵巢机能等有关，而且随着高频率重复采卵次数的增加，卵巢上卵泡数量呈减少趋势，且不正常的卵母细胞有增加的趋势。因此，OPU活体采卵仪对牛连续采卵的次数与采卵的时间间隔和牛的个体状况，操作技术等均有关系，不可一概而论。


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